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　　出處：

　　Phytomedicine IF=4.268

　　研究機(jī)構(gòu)：

　　西安交通大學(xué)藥學(xué)院

　　研究背景：

　　新型冠狀病毒病(2019-nCoV)自2019年底以來一直影響全球健康，控制傳染病的主要問題是缺乏有效的預(yù)防和治療方法。氯喹(CQ)和羥基氯喹(HCQ)已被報道用于臨床治療。目前，人們普遍認(rèn)為2019-nCoV是通過與細(xì)胞質(zhì)膜上的ACE2結(jié)合進(jìn)入宿主細(xì)胞，導(dǎo)致感染，因此，阻斷或拮抗敏感細(xì)胞中的ACE2信號通路對于預(yù)防2019-nCoV感染應(yīng)該是有益的。

　　研究方法：

　　采用CCK-8染色、流式細(xì)胞儀和免疫熒光染色分別檢測了CQ和HCQ對ACE2高表達(dá)的HEK293T細(xì)胞(ACE2h細(xì)胞)的毒性和自噬作用。通過分子對接和表面等離子體共振(SPR)實驗進(jìn)一步分析了CQ和HCQ與ACE2的結(jié)合特性，并用2019-nCoV刺突假型病毒觀察了CQ和HCQ對ACE2h細(xì)胞的致病作用。

　　結(jié)果：

　　CQ和HCQ可以結(jié)合ACE2，并抑制2019-nCoV刺突假型病毒進(jìn)入表達(dá)了ACE2的HEK293T細(xì)胞(ACE2h細(xì)胞)

　　結(jié)論：

　　1、CQ和HCQ對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE2h)細(xì)胞活力的影響

　　在相同濃度下，HCQ在不同時間點(diǎn)對ACE2h細(xì)胞的毒性均高于CQ，HCQ中羥甲基的存在使其與ACE2形成額外的氫鍵。這些不同的模式可能最終揭示了CQ和HCQ對ACE2的不同生物活性和親和力。且兩種藥物濃度對細(xì)胞凋亡無明顯影響。

　　2、CQ和HCQ可誘導(dǎo)ACE2h細(xì)胞LC3介導(dǎo)的自噬，CQ和HCQ可以通過破壞ACE2的末端糖基化來阻止病毒S蛋白與ACE2的結(jié)合。

　　3、 CQ和HCQ與ACE2的結(jié)合：分子對接CQ和HCQ與ACE2的結(jié)合，證實二者與ACE2蛋白的結(jié)合常數(shù)Kd分別為(7.31±0.62)e-7和(4.82±0.87)e-7M

　　4、CQ和HCQ作為ACE2阻斷劑可以抑制2019-nCoV假病毒進(jìn)入細(xì)胞

　　參考文獻(xiàn)： Nan, Wab , et al. "Chloroquine and hydroxychloroquine as ACE2 blockers to inhibit viropexis of 2019-nCoV Spike pseudotyped virus." Phytomedicine 79(2020).