一、背景及目的
血漿樣本中的NFL檢測(cè)作為實(shí)驗(yàn)室最常見的樣本類型及檢測(cè)服務(wù)需求量最大標(biāo)志物,針對(duì)血漿樣本中的NFL蛋白的保存穩(wěn)定性一直未進(jìn)行實(shí)際確定,通過此次測(cè)試可初步確定在不同操作環(huán)境下NFL蛋白在血漿樣本中的穩(wěn)定性并可指導(dǎo)后續(xù)生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)中的樣本處理操作。
二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1、樣本準(zhǔn)備:
測(cè)試所用樣本為早期客戶提供的剩余血漿,便于后期比對(duì)數(shù)據(jù)所有測(cè)試條件均使用同一血漿樣本完成:3mL血漿樣本渦旋混勻,10000g離心5min,取澄清樣本每管分裝150μL,-80℃凍存?zhèn)溆谩?/span>
2、樣本處理?xiàng)l件:
處理溫度為常溫(~23℃)及冷藏(~4℃)兩組實(shí)驗(yàn)條件,每組設(shè)置7個(gè)保存處理時(shí)間,共計(jì)14個(gè)實(shí)驗(yàn)條件,其中處理時(shí)間為0的樣本作為正常操作陽性對(duì)照,-80℃解凍混勻后與其他測(cè)試組樣本一同上機(jī)檢測(cè)。
3、上機(jī)檢測(cè):
使用Simoa NF-Light Advantage Kit(502625),所有測(cè)試樣本均一同上機(jī)檢測(cè),由儀器進(jìn)行2重復(fù)4×稀釋,所有標(biāo)曲點(diǎn)與樣本一同2重復(fù)參與上機(jī)檢測(cè),試劑盒內(nèi)參不參與上機(jī)檢測(cè)。
三、實(shí)驗(yàn)操作流程:按Quanterix NFL protocol及實(shí)驗(yàn)室常規(guī)技術(shù)服務(wù)流程
四、實(shí)驗(yàn)測(cè)試數(shù)據(jù)
1、標(biāo)曲數(shù)據(jù):
標(biāo)曲R2及CV等質(zhì)控參數(shù)均正常。
2、樣本數(shù)據(jù):
(1)組間組內(nèi)數(shù)據(jù)差異
(2)與對(duì)照樣本(0號(hào)樣本)數(shù)據(jù)差異
五、初步結(jié)論
血漿樣本內(nèi)的NFL蛋白穩(wěn)定性較高,在室溫/4℃存放48h內(nèi),對(duì)NFL蛋白的Simoa檢測(cè)結(jié)果無明顯影響。
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